11.4.3. Клеточные технологии — Вопросы и задания для повторения — 10 — стр. 329

В 1985 году Б.В. Конюховым и Е.С. Платоновым был разработан метод пересадки ядер с использованием микроманипуляции. Этот метод состоит из двух этапов: сначала микропипеткой прокалывают пеллюциду и плазматическую мембрану, чтобы извлечь пронуклеусы, затем в том же отверстии с помощью пипетки большего диаметра (12 мкм) вводят диплоидное ядро донорской клетки. Таким образом, цитоплазма зиготы меньше подвергается повреждениям, а пересаживаемое ядро донора успешно достигает места назначения.
Также существует метод трансплантации ядер с использованием цитохалазинов - веществ, синтезируемых грибами. Цитохалазин В разрушает структуру микрофиламентов и способствует уникальному расположению ядра, оставляя его связанным с клеткой тонким стебельком цитоплазмы. При центрифугировании этот стебель разрывается, образуя безъядерные клетки (цитопласты) и кариопласты, которые представляют собой ядра, окруженные тонким слоем цитоплазмы и цитоплазматической мембраной. Цитопласты отделяются от неповрежденных клеток с помощью градиента плотности. Они сохраняют способность присоединяться к поверхности культуральной посуды и могут использоваться для слияния с кариопластами других клеток для получения жизнеспособных клеток.
Методы выделения кариопластов включают сложные операции, включающие центрифугирование и разделение в градиенте плотности. В некоторых случаях к смеси клеток и кариопластов добавляются частицы тантала диаметром 1-3 мкм, которые проникают в клетки, но не в кариопласты, что позволяет быстрее осаждать более тяжелые клетки относительно кариопластов.